不同培养基配方对羊肚菌菌丝生长及菌核和子实体形成的影响

羊肚菌是世界上珍贵的稀有食用菌之一，属高级营养品。它富含蛋白质、碳水化合物、多  种维生素及20多种氨基酸，特别是有机锗含量高，具有补肾、壮阳、补脑、提神的功能；主治  精肾亏损、阳痿不举、性欲冷淡；对头晕失眠、肠胃炎症、脾胃虚弱、消化不良、饮食不振有  良好的辅助治疗作用；还可以防癌抗癌、预防感冒、增强人体免疫力，在医学上有重要的开发  价值。由于它功能齐全，香味独特，食疗效果显著，目前国内每千克售价800～1000元，尤其在  西欧国家供应十分紧俏，价格更昂贵。   

   因羊肚菌与其它食用菌不同，栽培适应性较差，特别是在异地栽培稳定性差。因此，利用  当地的羊肚菌品种分离制出的菌种，能适应当地环境，可避免异地购种的地区性差异和邮寄途  中的影响，建议种植户好分离当地的品种。它能适应当地环境，但也要注意羊肚菌的菌种隔  年使用效果不好，有变异现象。这就给大面积栽培和推广带来了困难。所以羊肚菌的菌种好  每年分离、驯化。这是迄今尚未实现商品化栽培的原因之一，加上栽培管理或环境达不到要求  就会不出菇。这就是羊肚菌人工栽培困难的奥秘。

 一、制种注意事项    

  羊肚菌的菌种性能与其它食用菌不同，菌种分离方法和育种手段及栽培管理技术与其它食  用菌也有很大差异。更大的缺点就是容易退化、变异、生霉。这对栽培羊肚菌带来很大困难。  对此，首先要控制菌种传代，无论母种、原种、栽培种，若违反技术要求，多传一代就会出现  上述不良反应或不长子实体。母种只能经过原种栽培种，到栽培中的一次流程和3次破菌愈合才  能保住质量；若超过3次菌丝断裂而重新萌发的新菌丝，会失去或降低酶的分解作用，以致抗病  力差，易生杂菌，不出菇。  

二、母种制作

  （一）培养基配方  ①黄豆芽500克（煮汁），白糖20克，琼脂20克，羊肚菌基脚～50克，水1升。 ②黄豆芽500克（煮汁），白糖20克，琼脂20克，水1升。  ③栎木屑500克（煮汁），白糖20克，琼脂20克，水1升。  ④马铃薯200克（煮汁），白糖20克，琼脂20克，蛋白胨0.5克，牛肉膏0.5克，水1升。  ⑤蛋白胨1克，葡萄糖20克，琼脂20克，酵母膏1克，磷酸二氢钾1克，硫酸镁1克，维生素B1，1  克，水1升。pH值自然。     

 上述配方任选一组。将木屑或豆芽加水1升煮30分钟，过滤取汁，并将余下的水补足1升，  加入其它原料，煮至溶化后，按母种制作常规方法，分装于18毫米×180毫米或20毫米×200毫  米试管的1/5，塞上棉塞，使用高压灭菌锅彻底灭菌；在0.68千克压力下维持60分钟，自然冷却  至指针回到原位才可打开，放成斜面备用。

  （二）菌种分离      首先要具有食用菌专业基础知识、多年的菌种分离经验及菌丝鉴别能力，其次要购置母种  培养基、无菌接种箱、恒温培养箱、冰箱、高倍显微镜等必要设备。根据当地羊肚菌生长季  节，趁羊肚菌生长旺盛时做菌种分离工作。

  1、分离方法。羊肚菌的分离方法与其它食用菌大不相同。它需要一种助生菌与羊肚菌菌丝共生  时才能出菇。这种助生菌长期活动在土壤中，有时以芽孢菌形式出现，有时以菌丝形式出现。  它为羊肚菌的原基形成和子实体生长发育起着至关重要的作用。因此，从土壤中分离该菌比其  它任何方式分离要好些。但从土壤分离难度太大，成功率不到万分之一，并且难以分辨，所以  只有采取羊肚菌基脚土分离，才能真正找到羊肚菌的出菇菌丝。初学者可在四川绵阳市食用菌  研究所购买培养好的羊肚菌优良母种，并参加现场培训。

  2、操作过程。在羊肚菌生长的周围，可见白色菌丝充满土壤。从土壤中挑选这种菌丝容易成  功。现介绍两种土壤分离的简易方法：一种是土壤直接分离，另一种是浸提分离。土壤直接分  离法：在羊肚菌生长的地方去掉羊肚菌，取周围5厘米以内的土壤，去掉表层，把土壤放入无菌  接种箱内，然后放入试管培养基，进行接种箱空间消毒。即按接种箱每立方米空间用甲醛10毫  升，高锰酸钾5克，混合产生气体消毒，半小时后才可操作。

将基脚土用接种针挑取黄豆大小一  块，迅速放到试管内的空白培养基上，每管放一块，塞上棉塞，接种后取出培养。浸提分离  法：将基脚土用无菌水稀释，澄清后用接种针蘸取少量溶液，滴到试管内的空白培养基上，塞  上棉塞后取出培养。  

    分离后，放在12～18℃温度下培养观察。3天后培养基上萌发菌丝，每天仔细检查每支试管  的发菌及变化情况。区分和认识各类杂菌是关键的核心技术。真正的羊肚菌菌丝初为灰白  色，生长很快，时间长会变成棕黄色，有时会出现菌核，母种7天长满试管，原种、栽培种15天  可长满瓶底。是否分离成功，必须做栽培出菇试验，待出菇后才能准确认定是否羊肚菌的菌  种。一旦菌种分离成功，在以后的转接过程中要小心，不能再让杂菌感染，必须把好高温灭菌  关和接种消毒关，才能保证菌种质量和成活率。  

（三）转接提纯  

     待培养基表面余水干后才能使用，否则会被细菌感染。接种要求在接种箱内通过药物灭菌  进行，将一代纯母种挑取黄豆大一块带菌丝的培养基，放入空白培养基上，每支母种可接10  ～15支，母种只能扩种一次，不能多接或多扩，否则会影响子实体生长。  

 （四）培养      

 接种后放在18～22℃温度下避光培养，2～3天菌丝萌发，7天可长满斜面培养基。如不使用  则放入冰箱在0～3℃温度下保存，时间都长不超过半年。   三、原种制作  

 （一）培养基配方   ①栎木屑50%，棉籽壳30%，麦麸 15%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。   ②栎木屑75%，米糠或麦麸20%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。   ③稻草粉70%，麦麸25%，石膏1.5%，过磷酸钙1.5%，土2%，pH值自然。   ④棉籽壳90%，木屑8%，土2%，pH值自然。   ⑤玉米芯50%，木屑30%，米糠15%，石膏1%，过磷酸钙1%，土3%，pH值自然。

   （二）操作过程       按配方将原料混合均匀，加入清水，使含水量达65%时装瓶。装瓶要求松紧一致，装至瓶  肩，将表面压平，洗去瓶壁内外沾染的培养基，塞上棉塞，或用塑料薄膜封口。 

 （三）灭菌   

    高压灭菌在0.68千克压力下维持1小时，常压灭菌在100℃温度下保持6～8小时。灭菌时间  不能过长或压力过高，否则会破坏其中养分。

  （四）接种与培养      接种在接种箱内经消毒后，每支母种可接种原种5～10瓶。接种后放在18～22℃温度下避光  培养，3天菌丝萌发吃料，10天菌丝布满培养基表面，15～20天菌丝长满瓶底。培养期间尽量避  免强光刺激，菌龄以不超过50天为好。菌丝寿命与温度有关，超过30℃以上几小时就死亡。

  四、栽培种制作 

 （一）培养基配方  ①栎木屑75%，米糠或麦麸20%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。  ②棉籽壳75%，麦麸20%，石膏1%，过磷酸钙1%，土3%，pH值自然。  ③稻草粉75%，麦麸15%，过磷酸钙2%，土3%，pH值自然。  ④玉米芯80%，米糠15%，石膏2%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。  ⑤农作物藤秆粉75%，米糠10%，麦麸10%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。   

（二）操作过程       按配方将原料混匀后，加水调至含水量为65%，装瓶，灭菌接种，培养。操作方法同上述原  种。经1个月菌丝长满瓶后就可用于生产栽培。